Cayman检测试剂盒(Assay kits)---基于细胞的检测试剂盒篇

组织蛋白酶S (Cathepsin S)检测试剂盒(Cell-Based) 产品编号： 600740

组织蛋白酶S (Cathepsin S)是一种半胱氨酸蛋白酶，属于重要的溶酶体蛋白酶，是主要的组织蛋白酶之一。组织蛋白酶S与基质金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶一起是参与胞外蛋白降解的重要内切酶。此外，还可以再胞外中性环境中发挥重要的生理功能等，如参与胞外基质降解、参与生长因子、血管增殖调解以及协调其他细胞因子调节等，从而在细胞迁移、增殖及凋亡等过程中发挥重要作用。Cayman研发的Cathepsin S检测试剂盒，利用组织蛋白酶S特异性底物Ac-KQKLR-AMC, 被催化反应后产生高荧光物质。激发光354nm,发射光442nm。

ERK/MAPK(Phospho-Thr202/Tyr204)磷酸化/转位检测试剂盒(Cell-Based) 产品编号： 10010549

细胞外信号调节激酶(ERK)是有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族的一个亚族, 参与细胞增殖、分化等信号的转导,该信号转导通路的过度活化与肿瘤的发生密切相关。Cayman研发的ERK/MAPK(Phospho-Thr202/Tyr204)磷酸化/转位检测试剂盒，可以在细胞内研究ERK/MAPK磷酸化以及转位(translocation)。试剂盒提供ERK/MAPK(Phospho-Thr202/Tyr204)磷酸化特异性抗体。同时也提供匹配的DylightTM标记二抗。试剂盒也提供可导致磷酸化ERK/MAPK(Phospho-Thr202/Tyr204)在胞质和细胞核间转位的塔莫克西芬(Tamoxifen), 作为阳性对照。

图. 在MCF-7细胞中，Tamoxifen诱导ERK/MAPK(Phospho-Thr202/Tyr204)从细胞质转位至细胞核。

溶酶体/细胞毒性(Lysosome/Cytotoxicity) 双染试剂盒产品编号： 600310

Cayman研发的溶酶体/细胞毒性(Lysosome/Cytotoxicity) 双染试剂盒，可实现在细胞水平对溶酶体功能进行研究。试剂盒采用细胞膜通透性的探针NBD-PZ, 与溶酶体酸性环境中的羧酸反应，因此可检测培养细胞溶酶体。试剂盒同时利用碘化丙啶作为检测细胞死亡的探针。氯喹(Chloroquine)作为溶酶体功能的抑制剂，作为阳性对照也包括在试剂盒中。

图.荧光显微镜观察发现在HepG2细胞中，氯喹(Chloroquine)促进溶酶体积累，但不促进细胞死亡。图A为对照，图B细胞经12.5uM的氯喹处理，用NBD-PZ及PI染色，可见NBD-PZ荧光强度增加，而PI指示的死亡细胞数量与对照相比无显著改变。

多重耐药性分析试剂盒(Multi-Drug Resistance) 分析试剂盒产品编号： 600310

P-糖蛋白(P-gp)，也被称为多耐药基因1(MDR1)和ABCB1，是一种170kDa的完整的质膜蛋白。P-糖蛋白是一个ATP依赖性转运蛋白，能将许多结构不同的化合物逆向转运出细胞。P-gp在人体正常组织肝脏、肾脏、肠道、胎盘、血脑屏障以及淋巴细胞系和心脏内小动脉、毛细血管等部位都有分布。P-gp在人体正常组织内的分布以及对药物的逆向转运功能使得P-gp在药物的吸收、分布、代谢和清除方面具有重要意义。Cayman开发的多重耐药性分析试剂盒，可轻松便捷的研究DMR蛋白调节分子。试剂盒采用MDR(包括P-gp和MRP)的底物-calceinn AM作为探针，检测与MDR蛋白反应的化合物。细胞核染料使用Hoechst Dye。同时，试剂盒还提供竞争性抑制剂-Cyclosporin A以及非竞争性抑制剂-Verapamil, 作为阳性对照。

图. 荧光显微镜观察Cyclosporin使calcein阳性细胞数量增多，MES-SA/Dx5单个细胞的荧光强度增强。

NAD+/NADH分析试剂盒(Cell-Based) 产品编号： 600480

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide Adenine Dinucleotide, NAD)以氧化状态NAD+，以及还原态NADH存在。 NAD+是细胞中主要的游离形式，调控细胞氧化还原状态，调控细胞信号传导以及转录等，因此NAD+及相关的酶也成为多种代谢疾病的药物靶点。Cayman研发的NAD+/NADH分析试剂盒采用比色法，可检测培养细胞胞内的NAD+/NADH。首先乙醇脱氢酶催化乙醇氧化形成乙酰乙醛和NADH，然后NADH将四唑盐还原形成有颜色的产物，最后在450nm处读取吸光度值即可。

p38 MAPK (Phospho-Thr180/Tyr182)磷酸化/转位检测试剂盒(Cell-Based) 产品编号： 10010374

p38 MAPK在应答炎症反应因子和应激时，Thr180和Tyr182发生磷酸化而被激活，在哮喘、自身免疫疾病以及神经系统应激等调节方面发挥重要作用。Cayman研发的p38 MAPK (Phospho-Thr180/Tyr182)磷酸化/转位检测试剂盒，提供p38 MAPK(Phospho-Thr180/Tyr182)磷酸化特异性抗体。同时也提供匹配的DylightTM标记二抗。试剂盒也提供可导致磷酸化p38 MAPK(Phospho-Thr180/Tyr182)转位至核内的Thrombin，作为阳性对照。

图. HeLa细胞中Thrombin诱导的p38 MAPK(Phospho-Thr180/Tyr182)转位至核内。

吞噬 (Phagocytosis)检测试剂盒(IgG-FITC) 产品编号：500290

吞噬作用是宿主抵抗外来病原菌的第一防线，是生物体最古老也是最基本的防卫机制之一。它包括一系列复杂的过程：细胞骨架的重新排列、膜运输的改变、杀菌机制的激活、炎症因子和趋化因子的产生，凋亡机制的启动以及产生调节后天免疫的分子等。Cayman开发的吞噬分析试剂盒(IgG-FITC)，是将异硫氰酸荧光素（FITC）标记的兔IgG包被在乳胶微球表面，作为探针，与细胞孵育。然后利用显微镜或者流式细胞仪来检测被吞噬的荧光微珠，从而在体外鉴定吞噬的水平。

图. THP-1细胞分化为吞噬细胞。图A为vehicle对照，图B为0.16uM PMA处理组，图C为1.6uM PMA处理组。

20S 蛋白酶体(Proteasome)检测试剂盒产品编号：10008041

蛋白酶体是一个含有很多蛋白酶的复合物，可以选择性降解胞内的蛋白。20S的蛋白酶体是26S蛋白酶体的核心组分。蛋白酶体的抑制剂可以作为抗炎症，抗恶性细胞增生的药物。Cayman开发的20S 蛋白酶体检测试剂盒，采用特异性的20S底物SUC-LLVY-AMC，其被酶催化水解后，可产生高荧光强度的产物，发射光为480nm。

分泌型碱性磷酸酶(Secreted Alkaline Phosphatase )报告基因分析试剂盒产品编号：600260

分泌型碱性磷酸酶(Secreted Alkaline Phosphatase, SEAP）是人胎盘碱性磷酸酶的突变体，与其他荧光素酶相比，SEAP最大特点是能从表达细胞分泌到细胞外，检测时可在不破坏细胞的情况下，任意时间点取细胞培养上清液进行重复、动态的检测，且被检测细胞还可继续其他用途。Cayman研发的SEAP分析试剂盒基于化学发光法，可高灵敏的定量检测检转染细胞上清中SEAP的含量。

脂肪变性(Steatosis )分析试剂盒产品编号：10012643

脂肪变性(Steatosis)，实质是细胞胞质内脂滴量超出正常生理范围或原不含脂肪的细胞出现游离性脂滴的现象，是中性脂肪(即甘油三酯)蓄积与非脂肪细胞的细胞质中，多发生于肝细胞、心肌细胞、肾小管上皮细胞、骨骼肌细胞等。Cayman开发的脂肪变性检测试剂盒，可用于评估候选药物导致脂肪变性的风险。油红O(Oil Red O)用于染色肝细胞中的中性脂肪，然后通过定量脂滴中的染料来检测脂肪变性水平。试剂盒中提供Chloroquine作为阳性对照。

图. Chloroquine对HepG2细胞中脂滴积累的影响。图A为vehicle处理，图B为HepG2细胞经25uM Chloroquine处理。